Indhold

• Bedre visualisering
• Identifikation og klassificering
• Feasibility detection
• Identifikation af cellulære strukturer

Mikrobiologer studerer egenskaberne ved mikroorganismer, såsom alger, bakterier, protozoer, svampe og vira, ved hjælp af et mikroskop. Selv om nogle organismer, såsom protozoer og gærceller, er let at se gennem lysbilleder, kræver bakterieceller farvning. Forskere har udviklet en række metoder, såsom Gram-farvningsteknikken, syrefast farvning og fluorescerende farvning for at forbedre visualisering af bakterieceller og cellestrukturer. Ved hjælp af sådanne farvningsmetoder er det muligt at identificere de strukturelle egenskaber, der hjælper med at klassificere bakterierne.

Farvningsteknikken hjælper med at forbedre visualiseringen af ​​bakterierne (Duncan Smith / Stockbyte / Getty Images)

Bedre visualisering

De bakterielle organismer er så små, at de fleste af dem kun er synlige under et mikroskop med en forstørrelse på 1000 gange. Enkel udvidelse giver dog ikke tilstrækkelig klarhed, så bakterier bør derfor farves forud for observation for at give den klarhed, der kræves til visualisering.

Identifikation og klassificering

Farvningen af ​​bakterier for at skelne mellem typerne af bakterier er kendt som differentiel farvning. Gramfarvning er en differentiel farvning, der adskiller bakterier som en funktion af cellevægsindholdet. I denne metode reagerer bakteriecellerne med et krystalviolet farvestof for at blive violet. Ved at tilføje et misfarvningsmiddel mister nogle bakterielle celler farve, mens andre ikke gør det. Ved at tilføje safraninfarvestof opkøles misfarvede celler rødt farvning, mens bakterieceller, der ikke mister farve forbliver violette. Røde celler kaldes gram-negative organismer, og dem, der ikke bliver røde, klassificeres som gram-positive organismer. Gramfarvningsteknikken giver en hurtig metode til den første identifikation af bakterier involveret i infektioner. På samme måde hjælper den syrebestandige farvningsproces med at specifikt identificere organismer, der tilhører klassen af ​​bakterier kaldet mycobakterier, såsom Mycobacterium tuberculosis.

Feasibility detection

I bakteriekulturprøver er det ofte vigtigt at detektere tilstedeværelsen af ​​levende bakterieceller. Metoder som fluorescerende farvning hjælper med at identificere, om kulturcellerne er levedygtige eller ej. Levende bakterier har evnen til at omdanne tetrazoliumchlorid-5-cyano-2,3-ditolyl (CTC) til et farvestof, der viser en rød fluorescens. Derfor, når CTC-farvede kulturer udsender disse fluorescenser, indikerer dette tilstedeværelsen af ​​levedygtige bakterier. Propidiumiodid er en farvning, der kun virker på ikke-levende celler, der har beskadigede membraner, og er derfor nyttige til identifikation af døde bakterieceller.

Identifikation af cellulære strukturer

Farvning giver en klar visualiseringsmetode til forskellige cellestrukturer. F.eks. Tillader Feulgen-farvningsmetoden identifikation af kernen inde i bakteriecellerne, medens Albert-farvningen er nyttig ved visualisering af metakromatiske granuler. Ligeledes tillader sølvimprægneringsteknikken identifikation af spirocheter. Flagella er let at se, når de er farvede med Ryu's farve. Malakit grøn farvning hjælper med at identificere bakterielle sporer.