Indhold
Undersøgelser med mikrobielle kulturer kræver ofte identifikation af organismer, der er til stede i dem. Når en lille del af en kultur introduceres på agar, der indeholder et næringsmedium, er det muligt at adskille en bakteriemasse i individuelle kolonidannende enheder. Hver af disse enheder udvikler sig i diskrete kolonier, der viser egenskaber, der hjælper med at identificere organismen.
Formål
Mikrobiologistudier kræver undersøgelse af morfologien for bestemte organismer. I nogle tilfælde skal de organismer, der er til stede i en blandet kultur, adskilles, før de kan analyseres. Det er således vigtigt at isolere disse mikrobielle kolonier. Bakteriekulturer indeholder et stort antal celler i en enkelt dråbe. Såning ved udtømning på en agarplade fortynder dem, så en enkelt bakteriecelle afsættes i et specifikt område af pladen. Flere af disse individuelle celler er adskilt med et par millimeter imellem. Hver af dem deler sig for at danne tusinder af nye celler, hvilket giver anledning til isolerede kolonier.
Princip
Agarpladen tilvejebringer et medium rig på næringsstoffer, der stimulerer vækst og formering af mikroorganismer. Spildevandsåning anvender kvadrantstrengningsmetoden, hvor hele pladen er opdelt i fire kvadranter. Når du bevæger dig fra en kvadrant til en anden, sker der en gradvis fortynding af den oprindelige kultur over hele den tilgængelige overflade. Kvadranten, du starter i, viser tæt og ikke-skelnet mikrobiel vækst, der ligner et tæppe af mikroorganismer, mens den sidste viser isolerede kolonier.
Materialer
Udstødningsåning kræver næringsagarplader, en sløjfe til podning, bakteriekulturen, en desinfektionsmiddelopløsning, såsom Lysol 10%, og en Bunsen-brænder. Du har også brug for sikkerhedsudstyr, såsom et forklæde, handsker og stænkbriller. Inokulum til dannelse af strækmærker er lavet af bakteriekulturen ved hjælp af sløjfen og ridser næringsagarpladerne. Bunsen-brænderen er til at flamme håndtaget under riller. Brug desinfektionsopløsningen til at rengøre overfladen, før du starter eksperimentet.
Metode
Brug en lille mængde inokulum til at så i den første kvadrant med en frem og tilbage bevægelse. Flamm håndtaget, og lad det køle af, og berør det til en del af agarpladen, der ikke er blevet podet. Rør ved den til den ene ende af det område, du lige såede, og stræk den derfra til den anden kvadrant. Flamme og afkøle sløjfen igen, og fra det andet område skal du arbejde med den tredje kvadrant. Gentag den samme proces med den fjerde kvadrant.
