Indhold
Fordelene og ulemperne ved lysmikroskopet henviser til lys, forstørrelse og opløsning. Lysmikroskoper forstørrer synligt lys - en åbenbar fordel, da dette er hvad vores øjne kan se. Imidlertid er forstørrelse (hvor stort et objekt vises) og opløsning (klarhed i detaljer) begrænset, når du bruger lysmikroskoper.
Lyskilde
Lysmikroskoper bruger enten et reflekterende spejl eller et elektrisk lys til direkte belysning gennem prøven og ind i linsesystemet. Spejlesystemer er billigere, men kræver tilstrækkelig omgivende belysning og mere tålmodighed til at justere. Elektriske lyssystemer er dyrere og kræver en stikkontakt i nærheden, men er lettere at bruge.
Lysintensitet
Lysintensitet (lysstyrke) er vigtig, da lys passerer gennem den prøve, du ser. Tynd, gennemsigtig prøve (klar) ses bedst med lys med lav intensitet, mens tykkere og uigennemsigtige prøver kræver et lys med højere intensitet. En ulempe ved lysmikroskopi er, at nogle prøver er for tykke eller uigennemsigtige til at blive set under denne type mikroskop. Meget tynde eller gennemsigtige prøver kan farves for at øge kontrasten for bedre visualisering. Denne proces vil dog dræbe levende prøver.
Justering af lysintensitet
Membranen, der ligger over lyskilden og under scenen (prøveplatform), justerer den mængde lys, der passerer gennem prøven. Der findes to typer membraner: en fast blændervælger og en justerbar blænde i kamerastil.
Den faste åbning består af flere forskellige åbningsstørrelser på en roterende plade. Den ønskede blænde vælges ved at dreje på drejeknappen. Membraner med fast blænde er billigere, men tilbyder mindre nøjagtig kontrol over lysintensitet.
Justerbar blændemembran giver kontinuerlig variabel blændestørrelse, ligesom f-stop på et kameralinse, og giver dermed mere præcis kontrol over lysintensitet. Disse systemer er dyrere.
Udvidelse
Større er ikke altid bedre. Lysmikroskoper kan forstørre objekter op til 1000 gange (tusind gange større end levetiden) meget godt. Derudover bliver billedet mere og mere forvrænget og sløret. At øge størrelsen skaber ikke et bedre billede og gør billedet faktisk ubrugeligt.
Ved brug af op til 1000 gange forstørrelse kan alle typer levende organismer ses, selv de mindste bakterieceller. Dette gør lysmikroskopi til et kraftfuldt værktøj til at studere celletyper, damvand, jordprøver og andre undersøgelser, hvor man ønsker et overblik over mikroorganismer. Lysmikroskopi er imidlertid af ringe anvendelse til undersøgelse af subcellulære strukturer på grund af opløsningsgrænserne, der er forbundet med brugen af lys.
Løsning
Opløsning er et mål for klarheden i gode detaljer produceret i et billede. Billeder med lav opløsning virker slørede eller "fuzzy". Billeder i høj opløsning er skarpe, klare og detaljerede. Den største ulempe ved lysmikroskoper er opløsningsgrænsen. Ud over forstørrelsen på 1000 gange mister lysmikroskoper hurtigt evnen til at finjustere små detaljer. Dette skyldes lysets fysiske egenskaber, ikke instrumentets kvalitet. For bedre opløsning af detaljer i subcellulære strukturer, bør andre teknologier, såsom elektronmikroskoper, anvendes.
